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| 油菜蜂花粉总RNA(含小RNA)大量提取及RT-qPCR检测 | |
| 作者单位： | ;1.浙江省中医药研究院基础实验研究所;2.浙江省中医药研究院中西医结合肿瘤研究所 |
| 摘 要： | 大量提取含小RNA的油菜蜂花粉总RNA,为研究油菜蜂花粉所含外源性miRNA在动物和人体内发挥的生理和病理功能研究奠定基础。改良苯酚-氯仿法大量提取油菜蜂花粉总RNA,Nanodrop 2000检测浓度和质量,琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性;所得的总RNA经过RT-qPCR扩增。提取的总RNA260/280为2.11,产量高于1‰。电泳条带清晰,完整性良好。可扩增出油菜基因组中的miR-159和miR-166a,且可进行丰度差异比较。本方法能大量提取包括油菜蜂花粉在内的植物RNA(含小RNA),为中草药和其他植物来源天然产物中功能性miRNA在动物和人体内发挥的生物学功能研究奠定基础。 |
| 关 键 词： | 油菜蜂花粉 总RNA大量提取 miRNA RT-qPCR |
Mass extraction of total RNA(containing small RNA) and RT-qPCR detection of rape(Brassica napus) bee pollen |
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