| 着丝粒特异性蛋白CENP-Ⅰ的原核表达、纯化及抗体制备 |
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| 作者姓名： | 蔡燕 翁亚光 施琼 徐远久 刘子杰 王应雄 |
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| 作者单位： | [1]重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016 [2]重庆医科大学公共卫生学院,重庆400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30371485）; 教育部博士点基金资助项目（20060631012）; 重庆市重点项目[渝科发计字（2004）47号] |
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| 摘 要： | 用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获得编码CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基酸的CENP-ⅠcDNA序列,采用基因体外重组法将其克隆到原核表达载体pET-32a（＋）内;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,用IPTG诱导表达、Ni^2＋-NTA亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白质;用纯化的蛋白质免疫家兔制备抗血清,琼脂糖免疫双扩法和Western blot鉴定得到高效价的特异性抗CENP-Ⅰ抗体.
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| 关 键 词： | 着丝粒特异性蛋白质 CENP-Ⅰ 染色体不稳定性 |
| 文章编号： | 1673-9868（2008）02-0143-06 |
| 收稿时间： | 2007-07-25 |
| 修稿时间： | 2007-07-25 |
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