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早酥梨抗黑星病相关基因PbzsREMORIN的克隆及功能分析
作者姓名:付镇芳  姚春潮  张朝红  王跃进
作者单位:(西北农林科技大学园艺学院,农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌 712100)
基金项目:国家‘863’计划项目,陕西省重点科技专项
摘    要: 以高抗黑星病的早酥梨为试材,利用从梨抗黑星病抑制消减文库中筛选出病原菌诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆获得其全序列,命名为PbzsREMORIN(GenBank登录号为HQ901373)。该基因全长897 bp,开放阅读框(ORF)597 bp,编码198个氨基酸;生物信息学分析表明该基因具有remorin家族保守结构域;实时荧光定量RT-PCR结果表明,该基因受梨黑星病病原菌的诱导;用基因枪法将基因与GFP的融合蛋白转化到洋葱鳞茎表皮细胞中,瞬时表达显示remorin蛋白定位于细胞膜、细胞质和细胞核中;将目的基因转入烟草品种NC89,共获得27个转基因烟草株系;离体叶片接种烟草青枯病病原菌结果表明,过量表达该基因增强了NC89对烟草青枯病病原菌的抗性。该基因可能在植物与病原菌互作过程中起重要作用。

关 键 词:  黑星病  remorin  基因表达  转基因烟草
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