摘 要: | 为建立检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕的间接ELISA方法,以精子膜蛋白为包被抗原,进行奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA的优化试验。对27头ASA阳性不孕和29头ASA阳性可孕奶牛进行了间接ELISA检测标准的确定试验;对137头奶牛的宫颈黏液ASA免疫不孕进行间接ELISA临床检测。奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA优化条件为:抗原包被量为5μg/mL,宫颈黏液稀释度为1:5,宫颈黏液反应时间1h,二抗反应时间1.5h;奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕检测的判定标准为:当样品OD490nm值大于0.513时判定为ASA阳性免疫不孕,当样品OD490nm值小于0.410时可孕,当样品OD490nm值介于0.410~0.513时为ASA阳性疑似,重复试验的变异系数均小于10%。对临床137份宫颈黏液样品进行检测,发现13头ASA阳性免疫不孕奶牛都不能受孕,而98头阴性结果牛中有89头怀孕。结果表明,间接ELISA可以有效检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕。
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