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奶山羊IL-22的原核表达
引用本文:赵莉娟,姚婧,韩炎森,牟珊,赵燕清,陈德坤. 奶山羊IL-22的原核表达[J]. 动物医学进展, 2010, 31(10)
作者姓名:赵莉娟  姚婧  韩炎森  牟珊  赵燕清  陈德坤
作者单位:西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵,712100
基金项目:农业部公益性行业(农业)科研专项 
摘    要:根据signal IP3.0信号肽分析软件分析结果,设计IL-22不含信号肽表达引物,PCR扩增获得奶山羊IL-22基因,连接表达载体pET-32a,重组质粒转化BL21感受态细胞。对阳性克隆进行诱导表达,对诱导温度、IPTG诱导浓度、诱导时间等条件进行优化,在最佳条件大量诱导蛋白表达。结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L、诱导5 h可获得IL-22最大表达量,目的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、变性和复性,纯度可达90%以上。本研究为进一步探讨IL-22在奶山羊乳腺免疫中的作用奠定了基础。

关 键 词:奶山羊  IL-22  原核表达

Prokaryotic Expression of Diary Goat IL-22
ZHAO Li-juan,YAO Jing,HAN Yan-sen,MOU Shan,ZHAO Yan-qing,CHEN De-kun. Prokaryotic Expression of Diary Goat IL-22[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2010, 31(10)
Authors:ZHAO Li-juan  YAO Jing  HAN Yan-sen  MOU Shan  ZHAO Yan-qing  CHEN De-kun
Affiliation:ZHAO Li-juan,YAO Jing,HAN Yan-sen,MOU Shan,ZHAO Yan-qing,CHEN De-kun (College of Veterinary Medicine,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi,712100,China)
Abstract:Prokaryotic expression vector of diary goat IL-22 was constructed and expresed in E.coli BL21(DE3).Expression primers without predicted signal sequece were desiged according to the prediction result by signal pepitide analysis software signalIP3.0.The IL-22 sequence was amplfied by PCR.The PCR product was cloned into the pET-32a plasmid.The recombinant plasmid was transformed into competent cells BL21.The positive clone was induced to express target protein,and the induction condition was optimized in diffe...
Keywords:IL-22
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