大麦黄矮病毒运动蛋白在烟草中的瞬时表达

目的]快速鉴定运动蛋白基因在烟草中的瞬时表达,进一步研究该外源基因的功能。方法]将大麦黄矮病毒的运动蛋白基因定向克隆到马铃薯X病毒载体上,得到重组的马铃薯X病毒,电击转化农杆菌后,利用农杆菌渗透注射技术注射到本生烟草的叶片中,观察病毒对烟草的侵染状况。结果]渗透注射后第7天观察,重组病毒载体侵染的烟草系统叶有病毒侵染症状,而对照组未有此现象。对2组试验进行逐日跟踪观察,重组病毒载体侵染的烟草有较严重的病毒侵染症状和叶片卷曲现象,后期引起注射叶及系统叶坏死。而空病毒载体侵染的烟草只有轻微的病毒侵染症状,并能够恢复健康。对侵染的烟草进行RT-PCR检测,结果表明外源基因BYDV-MP在烟草体内进行了正常的转录和表达。结论]BYDV-MP蛋白促进了PVX的系统侵染速度,加重了系统侵染的病毒症状,是病毒病症的决定因子;利用PVX表达载体表达异源MP的方法是可行的。

Transient Expression of BYDV-MP in Nicotiana benthamiana

Objective] The aim was to identify transient expression of movement protein(MP) gene in Nicotiana benthamiana rapidly and study functions of the exogenous gene.Method] The MP gene of Barley yellow dwarf virus(BYDV) was cloned into potato virus X(PVX) viral vector,pGR107,and the recombinant PVX vector,PVX-MP,was obtained,then electrotransformed into Agrobacterium tumefaciens.The infection phenomenon on the upper leaves in tobacco was observed after inoculating PVX using Agrobacterium tumefaciens infiltrati...