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秋石斛RT-qPCR内参基因的筛选与验证
引用本文:侯天泽,易双双,张志群,王健,李崇晖.秋石斛RT-qPCR内参基因的筛选与验证[J].园艺学报,2022(11):2489-2501.
作者姓名:侯天泽  易双双  张志群  王健  李崇晖
作者单位:1. 海南大学园艺学院;2. 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业农村部华南作物基因资源与种质创制重点实验室;3. 海南省热带观赏植物种质创新利用工程技术研究中心
基金项目:国家重点研发计划项目(2018YFD1000405);;海南省基础与应用基础研究计划(自然科学领域)高层次人才项目(2019RC308);;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(1630032020035,1630032017024);
摘    要:为了筛选出秋石斛中稳定表达的内参基因用于实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析,以不同品种和不同发育阶段花芽(包括花瓣、唇瓣和萼片)为材料,使用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件计算了常用的7个候选内参基因表达的稳定性,使用RefFinder对其稳定性进行综合评价,并对筛选出的内参基因进行了验证。结果表明,各内参基因在秋石斛花芽中的表达稳定性差异较大,在不同品种同一发育阶段的花芽中β-actin、TUA和GADPH表达最稳定;在花芽发育过程中β-actin、TUA和CYP表达最稳定;而对于花器官不同组织,β-actin、TUA和GADPH在萼片中,β-actin、CYP和PGK在花瓣中,CYP、TUA和PGK在唇瓣中表达最稳定。

关 键 词:秋石斛  花芽  发育阶段  组织  实时荧光定量PCR  内参基因  基因表达
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