SYBR Green I 结合碳纳米管对金黄色葡萄球菌的快速检测 |
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作者姓名: | 文晓棠 毛平道 邓 乐 |
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作者单位: | (1 铜仁职业技术学院 贵州 铜仁 554300 2 湖南师范大学生命科学学院 长沙 410081) |
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基金项目: | 国家“863”计划项目(2007AA062Z403) |
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摘 要: | 【目的】建立一种快速、准确检测金黄色葡萄球菌tst 基因的方法,为预防和控制金黄色葡萄球菌感染提供检测手段。【方法】采用一段特异识别金黄色葡萄球菌的DNA探针来识别基因组DNA,通过识别荧光染料SYBR Green I的信号来实现检测。通过对此方法的可行性、单壁碳纳米管最适浓度、目标链最适浓度、特异性等进行验证,建立产TSST-1金黄色葡萄球菌tst 基因的检测体系。【结果】在仅加入终浓度为1.07 nmol/L目标DNA的条件下,荧光值的恢复率达91%,荧光值的增强值为4.764。最适碳纳米管浓度为30 μg/mL,最适目标DNA浓度与探针DNA浓度相等,为1.07 nmol/L。特异性检测结果表明,该检测方法可以区分具有高相似性的序列(2-或12-nt的区别)。【结论】SYBR Green I结合碳纳米管适用于环境、食品及临床检验中对携带tst 基因的金黄色葡萄球菌的快速检测。
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关 键 词: | 金黄色葡萄球菌 tst 基因 SYBR Green I 单壁碳纳米管 检测 |
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