| 影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素 |
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| 引用本文： | 华进联,窦忠英,徐小明,李松,杨玉艾,雷安民. 影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素[J]. 农业生物技术学报, 2004, 12(3): 294-299 |
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| 作者姓名： | 华进联 窦忠英 徐小明 李松 杨玉艾 雷安民 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30200137,39570363),国家重点基础研究发展规划(973)(No.G199954301)和国家高技术研究发展计划(863)(No.2002AA216161)基金资助. |
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| 摘 要： | 探讨胚龄培养液、细胞因子、饲养层细胞等因素对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响。以4～13周龄流产胎儿生殖嵴或性腺为材料，小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、人胎儿成纤维细胞(hEF)、STO细胞和牛胎儿成纤维细胞(bEF)作饲养层，高糖DMEM(Dulbecco's minimum Eagle’s medium)为基础培养液，添加10^-4mol／L 2Me(2-巯基乙醇)、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、白血病抑制因子(LIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、干细胞冈子(SCF)等为培养液，探讨影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素。结果表明7～12周流产儿适于人类胚胎生殖细胞的分离克隆；人类胚胎生殖细胞体外培养以添加15％FBS为宜：添加4ng／mL LIF 4ng／mL bFGF 20ng／mL SCF能明显改善人类胚胎生殖细胞的分离克隆；MEF、STO、bEF和hEF可提高人原始生殖细胞(PGCs)的贴壁率，能促进PGCs源的人类胚胎干细胞(ES)的分离效率；以MEF作为饲养层效果较好。
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| 关 键 词： | 人类 胚胎生殖细胞 分离 克隆 原始生殖细胞 胚胎干细胞 |
| 修稿时间： | 2003-05-06 |
Influencing Factors on the Efficiency of Isolation and Culture of Human Embryonic Germ(EG) Cells |
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