| 绵羊肺炎支原体延伸因子EF-P基因的克隆、表达及其重组蛋白免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 田路路,孟庆玲,乔 军,于伟伟,孟 丹,李重阳,才学鹏,陈创夫.绵羊肺炎支原体延伸因子EF-P基因的克隆、表达及其重组蛋白免疫原性研究[J].西北农业学报,2017,26(11):1577-1583. |
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| 作者姓名： | 田路路 孟庆玲 乔 军 于伟伟 孟 丹 李重阳 才学鹏 陈创夫 |
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| 作者单位： | （1.石河子大学 动物科技学院， 新疆石河子 832003； 2.中国农业科学院 兰州兽医研究所， 兰州 730046） |
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| 基金项目： | 国家国际科技合作专项（No.2014DFR31310）；兵团中青年科技创新领军人才计划（2016BC001）。 |
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| 摘 要： | 为筛选绵羊肺炎支原体(MO)免疫相关蛋白,以MO新疆流行株基因组DNA为模板,通过PCR扩增其EF-P基因,测序后对其编码蛋白进行分子特征分析;用生物信息学软件预测其抗原表位集中区编码片段;进一步将该基因片段克隆入pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a(+)-EF-P,将pET-32a(+)-EF-P质粒转化至感受态细胞Escherichia coli BL21(DE3)中,IPTG诱导目的蛋白表达后,检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDS-PAGE结果显示,EF-P重组蛋白分子质量为29.5ku;Western blot结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,证实其具有良好的反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该重组蛋白可诱导机体产生特异性抗体,采用正向间接血凝方法检测效价可达1∶64,提示其具有较强的免疫原性。
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| 关 键 词： | 绵羊肺炎支原体 EF-P 克隆 表达 免疫原性 |
Cloning and Expression of EF-P Gene of Mycoplasma ovipneumoniae and Immunogenicity of Recombinant Protein |
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| TIAN Lulu,MENG Qingling,QIAO Jun,YU Weiwei,MENG Dan,LI Chongyang,CAI Xuepeng and CHEN Chuangfu.Cloning and Expression of EF-P Gene of Mycoplasma ovipneumoniae and Immunogenicity of Recombinant Protein[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2017,26(11):1577-1583. |
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| Authors: | TIAN Lulu MENG Qingling QIAO Jun YU Weiwei MENG Dan LI Chongyang CAI Xuepeng and CHEN Chuangfu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycoplasma ovipneumoniae EF-P Cloning Prokaryotic expression Immunogenicity |
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