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兔卵母细胞孤雌激活方法的研究
引用本文:向舒,杨金姬,石金月,张顺,王建,陆凤花,名德顺. 兔卵母细胞孤雌激活方法的研究[J]. 中国兽医学报, 2011, 31(7)
作者姓名:向舒  杨金姬  石金月  张顺  王建  陆凤花  名德顺
作者单位:广西大学动物繁殖研究所,广西南宁,530005
基金项目:国家“863”高科技研究发展计划资助项目(2008AA10-Z160)
摘    要:对兔卵母细胞的孤雌激活方法进行探讨,为兔的体细胞核移植奠定良好的技术平台。体外成熟培养20~22h的兔卵母细胞随机分组,分别进行以下试验:采用不同脉冲电压、脉冲次数和脉冲时间,电激活兔卵母细胞,摸索最佳电激活参数;比较不同的激活方法处理免卵母细胞的效果,Ⅰ:Ion5min+6-DMAP3h,Ⅱ:Ion5min+CHX3h,Ⅲ:Ion5min+6-DMAP联合CHX3h,Ⅳ:电激1次联合6-DMAP+CHX3h;优化6-DMAP与CHX作用时间。结果显示:当电激参数为:电压40V/mm,脉冲时间20μs和脉冲次数3次时,兔孤雌胚的分裂率和囊胚率最高,可达80.64%和14.51%;采用第Ⅳ种方法激活兔的卵母细胞,胚胎的分裂率和囊胚率(80.64%,13.71%)均显著高于Ⅰ组(66.67%,8.6%)和Ⅱ组(43.21%,1.24%,P〈0.05),略高于第Ⅲ组(77.59%,12.07%);当兔孤雌胚分别在含6-DMAP和CHX的CM中培养1。h和3h时,1h处理组在分裂率(80.68%vs77.59%)和囊胚率(15.91%vs12.07%)上都略高于3h处理组。结果表明:兔卵母细胞经Ion处理5min,或先电激1次(参数为电压40V/mm,脉冲时间20μs,脉冲3次),再用2mmol/L6-DMAP+5mg/LCHX处理1~3h,均可获得较好的激活效果,有利于兔孤雌胚的发育。

关 键 词:兔卵母细胞  电激活  离子霉素  6-DMAP  放线菌酮

Study on the parthenogenetic activation of rabbit oocytes
XIANG Shu,YANG Jin-ji,SHI Jin-yue,ZHANG Shun,Wang Jian,LU Feng-hua,Shi De-shun#. Study on the parthenogenetic activation of rabbit oocytes[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2011, 31(7)
Authors:XIANG Shu  YANG Jin-ji  SHI Jin-yue  ZHANG Shun  Wang Jian  LU Feng-hua  Shi De-shun#
Affiliation:XIANG Shu,YANG Jin-ji,SHI Jin-yue,ZHANG Shun,Wang Jian,LU Feng-hua,Shi De-shun#(Institute of Animal Reproduction,Guangxi University,Nanning 530005,China)
Abstract:
Keywords:rabbit oocytes  electro-activation  Ion  6-DMAP  CHX  
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