| 正交设计优化莲藕ISSR-PCR反应体系研究 |
| |
| 引用本文： | 李长春,阳天泉,戴余军,李建华,田春元.正交设计优化莲藕ISSR-PCR反应体系研究[J].北方园艺,2011(1):121-123. |
| |
| 作者姓名： | 李长春 阳天泉 戴余军 李建华 田春元 |
| |
| 作者单位： | 孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000;孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000;孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000;孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000;孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000 |
| |
| 基金项目： | 湖北省教育厅优秀中青年人才资助项目(Q20102701); 湖北省农业资源利用重点(培育)学科资助项目(鄂学位〔2010〕1号) |
| |
| 摘 要： | 利用正交实验设计的方法,对莲藕ISSR-PCR反应的四因素(TaqDNA聚合酶浓度、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+浓度)三水平进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测。结果表明:20μL的ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度为:10×PCRbuffer 2.0μL、dNTP150μmol/L、引物1.2μmol/L、Mg2+2.0 mmol/L和TaqDNA聚合酶4 U,最佳模板DNA浓度为40～60 ng,引物U826的最佳退火温度为48.7℃。
|
| 关 键 词： | 莲藕 ISSR-PCR 反应体系 正交设计 |
Optimization for ISSR-PCR Reaction System in Lotus Root Using Orthogonal Design |
| |
| LI Chang-chun,YANG Tian-quan,DAI Yu-jun,LI Jian-hua,TIAN Chun-yuan.Optimization for ISSR-PCR Reaction System in Lotus Root Using Orthogonal Design[J].Northern Horticulture,2011(1):121-123. |
| |
| Authors: | LI Chang-chun YANG Tian-quan DAI Yu-jun LI Jian-hua TIAN Chun-yuan |
| |
| Institution: | LI Chang-chun,YANG Tian-quan,DAI Yu-jun,LI Jian-hua,TIAN Chun-yuan(College of Life Science and Technology,Xiaogan University,Xiaogan,Hubei 432000) |
| |
| Abstract: | The orthogonal design was used to optimize the ISSR-PCR amplification system of Lotus root in four factors(the concentration of)TaqDNA polymerase,dNTP,Primers and Mg2+) at three levels.Then,based on the optimal ISSR-PCR amplification system,the concentration of template DNA and annealing temperature were proposed by gradient PCR.The results showed that 10×PCR buffer 2.0 μL,dNTP 150 μmol/L,primers1.2 μmol/L,Mg2+ 2.0 mmol/L,Taq DNA polymerase 4 U and 40～60 ng template DNA in a total volume of 20 μL were suitable for ISSR-PCR amplification system of lotus root.The optimal annealing temperature for primers U826 was 48.7℃. |
| |
| Keywords: | lotus root ISSR-PCR reaction system orthogonal design |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
