| 地衣芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 吕文平,许梓荣,杜文理,李卫芬,孙建义. 地衣芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达[J]. 农业生物技术学报, 2004, 12(4): 446-449 |
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| 作者姓名： | 吕文平 许梓荣 杜文理 李卫芬 孙建义 |
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| 作者单位： | 浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 高等学校骨于教师资助计划资助和国家自然科学基金(No.30000118). |
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| 摘 要： | 提取地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)基因组，通过PCR克隆了该菌的β-1，3-1，4．葡聚糖酶基因全长。该基因全长818bp,ORF为732bp,编码243个氨基酸，计算分子量为27.35kD，等电点为8．31。经Blast分析，该序列与短小芽孢杆菌(B．pumilus)同源性最高(99％)，而与基因库中地衣芽孢杆菌的同源性为94％，该基因已被GenBank接受(AY225317)。用BamHI和XhoⅠ双酶切目的片断和表达载体pET-30a( )后相连接，构建重组表达载体pET-lic，并导人大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中表达。酶学特性表明：SDS-PAGE电泳在27kD左右有表达蛋白带，该工程菌总酶活达67．34U／mL，是出发菌的60倍，最适温度在50℃左右，最适pH在5～6之间。该工程菌可作为材料构建耐热性好和酶活高的杂合基因工程菌。
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| 关 键 词： | 地衣芽孢杆菌 葡聚糖酶基因 β-1 克隆和表达 SDS-PAGE电泳 GenBank 短小芽孢杆菌 重组表达载体 PCR克隆 Blast 基因工程菌 大肠杆菌 最适温度 最适pH 同源性 基因组 氨基酸 分子量 等电点 基因库 双酶切 特性表 耐热性 |
| 修稿时间： | 2003-07-25 |
Cloning and Expression of β - 1,3-1,4-glucanase Gene from Bacillus licheniformis |
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