| 萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 武悦,徐良,王娟娟,龚义勤,谢洋,柳李旺. 萝卜硝酸还原酶基因的克隆与表达分析[J]. 南京农业大学学报, 2015, 0(2): 205-211 |
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| 作者姓名： | 武悦 徐良 王娟娟 龚义勤 谢洋 柳李旺 |
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| 作者单位： | 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺学院;全国农业技术推广服务中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31372064);江苏省自然科学基金项目(BK20140706);江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(12)2006,CX(13)2007] |
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| 摘 要： | [目的]为揭示萝卜(Raphanus sativus L.)硝酸还原酶基因(RsNR)的分子特征,降低硝酸盐含量,对萝卜RsNR基因进行分离与表达特性研究。[方法]基于本实验室转录组测序所得unigene序列分离RsNR基因cDNA,利用生物信息学方法进行序列分析,采用RT-qPCR方法对不同浓度KNO3(0、5、20、30和50mmol·L-1)和不同时间(0、4、8、12和24h)处理的萝卜中RsNR基因表达进行检测,并测定硝酸盐含量和硝酸还原酶活性(NRA)。[结果]获得萝卜RsNR基因cDNA序列(GenBank登录号:KM272859),开放阅读框为2742bp,编码913个氨基酸,RsNR与油菜NR基因(D38219)氨基酸序列相似性为95%。在30mmol·L-1NO-3-N诱导下,萝卜叶片和根中RsNR基因表达量最高。在30mmol·L-1NO-3-N诱导初期,叶片和根中RsNR表达量4h达到最大值,随后呈下降趋势;随着硝酸盐处理浓度升高,NRA、硝酸盐含量和RsNR基因表达量均呈先升后降趋势,0~4h内叶片和根中三者均上升,4~24h内NRA和RsNR基因表达下降,而硝酸盐含量呈上升趋势。[结论]NO-3-N可能在转录水平上调控萝卜RsNR基因表达,进而影响其硝酸盐含量和NRA。
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| 关 键 词： | 萝卜 基因表达 硝酸还原酶基因(NR) NO-3-N处理 |
Cloning and molecular characterization of nitrate reductase gene in radish(Raphanus sativus L.) |
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| WU Yue;XU Liang;WANG Juanjuan;GONG Yiqin;XIE Yang;LIU Liwang. Cloning and molecular characterization of nitrate reductase gene in radish(Raphanus sativus L.)[J]. Journal of Nanjing Agricultural University, 2015, 0(2): 205-211 |
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| Authors: | WU Yue XU Liang WANG Juanjuan GONG Yiqin XIE Yang LIU Liwang |
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| Affiliation: | WU Yue;XU Liang;WANG Juanjuan;GONG Yiqin;XIE Yang;LIU Liwang;State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement/Key Laboratory of Horticultural Crop Biology and Genetic Improvement( East China) ,Ministry of Agriculture / College of Horticulture,Nanjing Agricultural University;The National Agro-Tech Extension and Service Center; |
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