| 猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 刘长龙,张建武,韦祖樟,袁世山. 猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与应用[J]. 中国预防兽医学报, 2010, 32(11). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.07 |
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| 作者姓名： | 刘长龙 张建武 韦祖樟 袁世山 |
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| 摘 要： | 为快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),本研究针对PRRSV的N蛋白基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,以体外转录的RNA作为标准品,设计并优化了检测PRRSV的TaqMan荧光定量PCR方法。应用该方法检测其它主要猪病病原,结果均呈阴性;针对PRRSV阳性RNA的检测灵敏度可以达到10拷贝,比常规PCR灵敏10倍～100倍;结果表明,本实验建立的PRRSV TaqMan荧光定量PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。应用建立的方法测定攻毒猪血清中病毒的含量,免疫攻毒组和非免疫攻毒组在第7 d血清中病毒的载量差异不显著,而在第14 d差异显著,免疫攻毒组猪血清中病毒载量明显低于未免疫组。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光定量PCR TaqMan探针 RNA标准品 |
Development and application of TaqMan one-step fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| LIU Chang-long,ZHANG Jian-wu,WEI Zu-zhang,YUAN Shi-shan. Development and application of TaqMan one-step fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2010, 32(11). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.07 |
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| Authors: | LIU Chang-long ZHANG Jian-wu WEI Zu-zhang YUAN Shi-shan |
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