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水稻条纹病毒CP与叶绿体Rubisco SSU引导肽融合基因的构建及其原核表达
引用本文:鹿连明,林丽明,谢荔岩,林奇英,吴祖建,谢联辉.水稻条纹病毒CP与叶绿体Rubisco SSU引导肽融合基因的构建及其原核表达[J].农业生物技术学报,2008,16(3).
作者姓名:鹿连明  林丽明  谢荔岩  林奇英  吴祖建  谢联辉
作者单位:福建农林大学植物病毒研究所,福建省植物病毒学重点实验室,福州,350002
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),国家自然科学基金,高等学校博士学科点专项科研项目,福建省自然科学基金
摘    要:PCR扩增获得水稻(Oryza sativa L.ssp.japonica)叶绿体Rubisco SSU引导肽基因和水稻条纹病毒(Rice stripe virusRSV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因.分别借助于pGEX-4T-1和pET-29a表达载体,通过两种方法构建了融合基因PR-CP和PR-S-CP.测序表明,其读码框完整,连接部位正确.将重组子pGEX-PR-CP和pET-PR-S-CP转化大肠杆菌(Eschetichia coli)BL21(DE3)并诱导表达.SDS-PAGE电泳检测其表达产物分子量分别为64和40 kD,与预期结果大小一致.Western blot鉴定发现.两种融合基因的表达产物均能与RSVCP抗体特异结合,说明融合蛋白中RSVCP蛋白保持了自身的抗原活性,叶绿体Rubisco SSU引导肽并未影响其正确表达.可以推断两种融合基因PR-CP和PR-S-CP在生物体内表达时,融合蛋白中的Rubisco SSU引导肽和RSV CP蛋白可能都能保持各自独立的结构和功能.

关 键 词:水稻条纹病毒外壳蛋白  Rubisco  SSU引导肽  融合基因  原核表达

Construction of Fusion Gene of Rice stripe virus (RSV) CP and Rubisco SSU Leader Peptide of Rice Chloroplast and Their Prokaryotic Expression
LU Lian-ming,LIN Li-ming,XIE Li-yan,LIN Qi-ying,WU Zu-jian,XIE Lian-hui.Construction of Fusion Gene of Rice stripe virus (RSV) CP and Rubisco SSU Leader Peptide of Rice Chloroplast and Their Prokaryotic Expression[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2008,16(3).
Authors:LU Lian-ming  LIN Li-ming  XIE Li-yan  LIN Qi-ying  WU Zu-jian  XIE Lian-hui
Abstract:
Keywords:
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