| 微波冻融法预处理用于酵母菌落PCR检测 |
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| 引用本文： | 李闯,彭志清,李寅琛,吴升山,林鹿,曾宪海.微波冻融法预处理用于酵母菌落PCR检测[J].福建农林大学学报(自然科学版),2022(5):705-712. |
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| 作者姓名： | 李闯 彭志清 李寅琛 吴升山 林鹿 曾宪海 |
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| 作者单位： | 1. 厦门大学能源学院;3. 厦门市生物质清洁高值化利用重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划“可再生能源与氢能技术”专项(2019YFB1503904)； |
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| 摘 要： | 为实现酵母阳性转化子的高效筛选，亟需寻找一种快速、简便的菌落PCR方法用于酵母的分子遗传鉴定.以酿酒酵母为底盘微生物，转化重组质粒或染色体整合片段，挑选抗性筛选单菌落，采用不同预处理方法处理菌体以进行菌落PCR检测，并对结果进行分析.相比其他预处理方法，使用微波冻融法制备的模板进行菌落PCR检测，稳定性好、检测性能强，适用于短链DNA以及3 000 bp以上目的片段的扩增；同时，该方法可进行毕赤酵母阳性克隆的筛选.表明微波冻融法通用性较强，制备的模板适合不同遗传背景以及基因操作方式下酵母菌落PCR检测.
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| 关 键 词： | 酿酒酵母 菌体预处理 菌落PCR 微波 冻融 |
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