| 鸡TRAF3基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 李春平,李拓凡,万志敏,邵红霞,秦爱建,叶建强.鸡TRAF3基因的克隆表达及多克隆抗体的制备[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2022(4):45-50. |
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| 作者姓名： | 李春平 李拓凡 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院/禽类预防医学教育部重点实验室/江苏省动物预防医学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心/农业科技发展研究院/教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(31972661)； |
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| 摘 要： | 为探究鸡源肿瘤坏死因子受体相关因子3 (TRAF3)的生物学功能，对鸡源TRAF3基因进行克隆表达并制备其多克隆抗体。将鸡TRAF3基因分别克隆入原核表达载体pGEX-6P-1和真核表达载体pcDNA3.1中构建出重组原核表达载体pGEX-6P-1-TRAF3和重组真核表达载体pcDNA3.1-TRAF3。构建的原核表达载体转化入大肠埃希菌BL21后经IPTG诱导，SDS-PAGE分析表明获得GST-TRAF3的融合表达蛋白，且融合蛋白主要表达于包涵体中。将纯化的GST-TRAF3蛋白免疫小鼠制备抗GST-TRAF3多克隆抗体。间接免疫荧光及Western blot试验表明，所制备的抗TRAF3多克隆抗体不仅能与转染pcDNA3.1-TRAF3的DF-1及LMH细胞中表达的外源性TRAF3反应，而且能有效识别LMH细胞内源性的鸡源TRAF3蛋白。该研究中鸡TRAF3基因的克隆、表达及其多克隆抗体制备为后续研究鸡TRAF3的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鸡源TRAF3 原核表达 真核表达 多克隆抗体 |
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