| 猪轮状病毒Vp4全基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达 |
| |
| 引用本文： | 王春凤,李玉.猪轮状病毒Vp4全基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达[J].中国预防兽医学报,2006,28(6):645-649. |
| |
| 作者姓名： | 王春凤 李玉 |
| |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学,动物科学技术学院,吉林,长春,130118
2. 吉林农业大学,菌物研究所,吉林,长春,130118 |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);吉林省科技厅科研项目;国家自然科学基金;吉林省杰出青年科学基金;中国博士后科学基金;吉林农业大学校科研和教改项目 |
| |
| 摘 要： | 以猪A组轮状病毒mRNA为模板，应用优化的反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）技术，扩增了2331 bp的Vp4全长基因，通过T-A克隆技术，将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中，构建质粒pGEM-T-Vp4。以SalⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM—T—Vp4．和以胸苷酸合成酶基因（thymidylate synthase，thyA）为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t，并将纯化的Vp4基因亚克隆至表达载体pW425t中，构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp4。将pW425t-Vp4转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E．coli X13中，通过生长功能弥补筛选阳性克隆，SDS-PAGE分析，可见约87.67Ku融合蛋白。Western blot分析表明，该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性，研究结果为pW425t-Vp4在乳酸菌受体菌株中表达提供科学依据。
|
| 关 键 词： | 轮状病毒 Vp4基因 乳酸菌表达载体 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1008-0589(2006)06-0645-05 |
| 收稿时间： | 2005-11-05 |
| 修稿时间： | 2005年11月5日 |
Expression of recombinant Vp4 full gene of porcine Rotavirus A with non-antibiotic lactobacillus vector in Escherichia coli |
| |
| WANG Chun-feng,LI Yu.Expression of recombinant Vp4 full gene of porcine Rotavirus A with non-antibiotic lactobacillus vector in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2006,28(6):645-649. |
| |
| Authors: | WANG Chun-feng LI Yu |
| |
| Institution: | 1. College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China; 2. Institute of Mycology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Rotavirus Vp4 gene Lactobacillus vector Escherichia coli |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
