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H1亚型猪流感病毒微滴数字RT-PCR定量检测方法的建立
引用本文:谭建锡,禹思宇,唐连飞,胡忆文,白雪,侯义宏. H1亚型猪流感病毒微滴数字RT-PCR定量检测方法的建立[J]. 中国动物检疫, 2019, 36(11): 77-82
作者姓名:谭建锡  禹思宇  唐连飞  胡忆文  白雪  侯义宏
基金项目:湖南省农业领域技术创新项目(2016NK2174)
摘    要:本研究针对H1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)HA基因保守序列设计引物和探针,通过反应条件优化,建立了一种快速、准确检测H1亚型SIV的微滴数字RT-PCR定量方法。该方法特异性强,除H1亚型SIV外,H3、H5、H7亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等检测均为阴性;敏感性高,最低可检测4.7拷贝/μL;重复性好,对5个不同稀释度的H1亚型SIV RNA进行3次重复试验,每个稀释度的变异系数均小于5%。利用该方法对湖南省规模化养殖场收集的30份猪鼻拭子样品进行检测,发现与荧光RT-PCR检测结果一致。试验表明,该方法快速、准确、灵敏,可为H1亚型SIV的快速筛查及流行病学研究提供可靠的技术保障。

关 键 词:H1亚型猪流感病毒;微滴数字RT-PCR;绝对定量;检测方法

Establishment of a Droplet Digital RT-PCR Method for Detection of H1 Subtype Swine Influenza Virus
Tan Jianxi,Yu Siyu,Tang Lianfei,Hu Yiwen,Bai Xue,Hou Yihong. Establishment of a Droplet Digital RT-PCR Method for Detection of H1 Subtype Swine Influenza Virus[J]. China Animal Health Inspection, 2019, 36(11): 77-82
Authors:Tan Jianxi  Yu Siyu  Tang Lianfei  Hu Yiwen  Bai Xue  Hou Yihong
Abstract:
Keywords:
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