| 猪肺炎支原体和猪鼻支原体TaqMan双重荧光PCR检测方法的建立及应用 |
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| 作者姓名： | 周颖 赵硕 覃国喜 梁龙华 肖婷 陈忠伟 卢冰霞 秦毅斌 林昌华 张胜斌 段群棚 胡庭俊 何颖 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院;2. 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)G东盟跨境动物疫病防控重点实验室;3. 广西农垦永新畜牧集团金光公司;4. 广西农垦永新畜牧集团西江公司 |
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| 基金项目： | 南宁市科学研究与技术开发计划项目(20222043,20232039)；;玉林市科学研究与技术开发计划项目(玉市科20220515,20220516)；;贵港市科学研究与技术开发计划项目(桂科计2117003、202203011)； |
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| 摘 要： | 为建立一种可快捷鉴别检测猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的方法，针对Mhp的183基因和Mhr的p37基因保守片段，分别设计合成引物及TaqMan探针，优化反应条件，建立一种可同时检测Mhp和Mhr的TaqMan双重荧光PCR方法，并评价其特异性、敏感性和重复性。结果表明，该方法特异性强，检测其他常见猪呼吸系统病原不发生交叉反应；对标准品pMD18-T-Mhp-183、pMD18-T-Mhr-P37的最低检测限分别达45.2 copies/μL和29.7 copies/μL,比普通PCR检测灵敏度提高103～104倍；该方法检测结果的批内与批间变异系数均小于2%。用该方法检测145份广西自治区内临床样品，从中检出82份Mhp和9份Mhr阳性样品。该方法可用于临床样品快速检测及实验室Mhp和Mhr的鉴定，可为Mhp和Mhr在猪群中的早期监测提供技术支持。
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| 关 键 词： | 猪肺炎支原体 猪鼻支原体 TaqMan荧光定量PCR |
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