| 能产生多角体的可线性化杆状病毒的构建 |
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| 引用本文： | 于峰,朱姗颖,李兵,沈卫德,王文兵.能产生多角体的可线性化杆状病毒的构建[J].中国农业科学,2008,41(11):3893-3897. |
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| 作者姓名： | 于峰 朱姗颖 李兵 沈卫德 王文兵 |
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| 作者单位： | 江苏大学生命科学研究院，苏州大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 江苏大学青年基金
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江苏省农林厅"六大人才高峰"基金
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| 摘 要： | 【目的】改进用于同源重组研究的制备杆状病毒DNA的方法。【方法】采用PCR方法从BmNPV中扩增出多角体基因，并在其两端引入Bsu36 I酶切位点。将此片段克隆入转移载体pBacPAK8中，与线性化的杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，获得重组病毒。该病毒能形成多角体，便于纯化，同时可以被 Bsu36 I酶切。该重组病毒的多角体纯化后被裂解，并提取病毒DNA。病毒DNA经Bsu36 I酶切后，与含gfp基因的转移质粒共转染家蚕BmN细胞，在荧光显微镜下观察重组病毒的转染效率。【结果】BmNPV多角体基因克隆入转移载体pBacPAK8中后，与线性化的AcPak6及BmPak6 DNA共转染sf细胞及BmN细胞，均能产生大量的多角体。获得的重组病毒DNA经酶切后，进一步与含gfp基因的转移质粒共转染的实验表明，这种改造后的重组病毒仍具有较高的转染重组率。【结论】本实验成功地对用于同源重组的杆状病毒DNA进行了改进，简化了病毒DNA的纯化方法，并且重组效率较高。
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| 关 键 词： | 昆虫-杆状病毒 表达 BmNPV DNA提取 |
| 收稿时间： | 2007-5-18 |
Improvement of Baculoviral DNA Extraction in Insect-Baculovirus Expression System |
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| YU Feng,ZHU Shan-ying,LI Bing,SHEN Wei-de,WANG Wen-bing.Improvement of Baculoviral DNA Extraction in Insect-Baculovirus Expression System[J].Scientia Agricultura Sinica,2008,41(11):3893-3897. |
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| Authors: | YU Feng ZHU Shan-ying LI Bing SHEN Wei-de WANG Wen-bing |
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| Institution: | YU Feng1,ZHU Shan-ying1,LI Bing2,SHEN Wei-de2,WANG Wen-bing1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BmNPV |
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