| 两种抗病基因双T-DNA区双元载体的构建 |
| |
| 引用本文： | 吴磊,史秀岚,田巍,刘巧泉,王幼平.两种抗病基因双T-DNA区双元载体的构建[J].分子植物育种,2010,8(5). |
| |
| 作者姓名： | 吴磊 史秀岚 田巍 刘巧泉 王幼平 |
| |
| 作者单位： | 1. 扬州大学生物科学与技术学院,扬州,225009
2. 扬州大学农学院,扬州,225009 |
| |
| 基金项目： | 转基因重大专项，江苏省大学生实践创新训练计划共同资助 |
| |
| 摘 要： | 选择标记基因的删除是植物转基因工程中重要的步骤之一,双T-DNA区双元载体转化法以其共整合频率高、删除标记基因效率高的优点在植物遗传转化中应用非常广泛。本文通过构建天麻抗真菌蛋白基因、脂质转移蛋白基因双T-DNA区双元载体,为培育不含选择标记基因的抗病新材料奠定基础。通过PCR的方法克隆GAFP基因,产物纯化测序确定序列准确后与pSB130-35S载体进行BamHⅠ、SacⅠ双酶切;pCAMBIA2300-LTP、pSB130-35S经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,酶切产物纯化后连接,连接产物转化大肠杆菌。采用基因特异性引物进行菌液PCR鉴定阳性克隆,重组质粒pSB130-GAFP、pSB130-LTP双酶切产物大小分别为540bp、1200bp,与预期产物大小一致,pSB130-GAFP、pSB130-LTP双T-DNA区双元载体构建成功。载体pSB130-GAFP、pSB130-LTP转化根癌农杆菌后可以直接用于植物的遗传转化。
|
| 关 键 词： | 双元载体 双T-DNA区 天麻抗真菌蛋白基因 脂质转移蛋白基因 |
Construction of Twin T-DNA Binary Vectors Harboring Two Disease Resistance Genes |
| |
| Wu Lei,Shi Xiulan,Tian Wei,Liu Qiaoquan,Wang Youping.Construction of Twin T-DNA Binary Vectors Harboring Two Disease Resistance Genes[J].Molecular Plant Breeding,2010,8(5). |
| |
| Authors: | Wu Lei Shi Xiulan Tian Wei Liu Qiaoquan Wang Youping |
| |
| Institution: | Wu Lei 1 Shi Xiulan1 TianWei 1 LiuQiaoquan2 Wang Youping 1 1College of Bioscience andBiotechnology,YangzhouUniversity,Yangzhou,225009,2 Agricultural College of YangzhouUniversity |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Binary vector Twin T-DNA Gastrodia antifungal protein gene(GAFP) Lipid transfer protein gene(LTP) |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
