PCR检测鸭瘟病毒的研究 |
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作者姓名: | 韩先杰 王君伟 布日额 李慧昕 高宏丽 |
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作者单位: | [1]莱阳农学院动物科技学院,山东莱阳265200 [2]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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摘 要: | 根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列,设计、合成了1对引物,以1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板,进行:PCR扩增,扩增出预期563bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMDl8—T载体,经Amp/IPTG/X-gal平板筛选,HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定,与参考序列比较,二者同源性为99.3%。小鹩瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒:PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织(脑、肝、脾),均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性,能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。
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关 键 词: | 鸭瘟 鸭瘟病毒 PCR 基因测序 检测 |
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