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猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定
引用本文:周宏专,覃湘婕,杨兵,徐福洲,满坤,苏霞,张晓东,刘爵,罗绪刚,王金洛.猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定[J].华北农学报,2014(6).
作者姓名:周宏专  覃湘婕  杨兵  徐福洲  满坤  苏霞  张晓东  刘爵  罗绪刚  王金洛
作者单位:1. 北京市农林科学院 畜牧兽医研究所,畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097; 中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所 矿物元素营养研究室,北京 100193
2. 北京市农林科学院 畜牧兽医研究所,畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097; 北京农业生物技术研究中心,北京 100097
3. 北京市农林科学院 畜牧兽医研究所,畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097
4. 北京农业生物技术研究中心,北京,100097
5. 中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所 矿物元素营养研究室,北京,100193
基金项目:北京市科技计划项目,北京市农林科学院博士后基金
摘    要:通过原核表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒( TGEV) S基因不同编码区,以鉴定不同编码区表达产物与TGEV抗体的结合能力。在对TGEV S蛋白抗原位点分析的基础上,针对S蛋白N端的4个抗原位点C、B、D和A,设计引物分别扩增含C、B位点的TCB片段(411 bp)、含D位点的TD片段(441 bp)和含A位点的TA片段(456 bp),经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行表达,SDS-PAGE电泳显示各片段均高效表达,表达的TCB片段、TD片段和TA片段融合蛋白大小分别为34.6,35.1,36.1 kDa。 Western Blot结果表明,表达蛋白与TGEV感染猪阳性血清和His标签抗体均产生阳性反应。结果显示,3个S基因编码片段均具有与TGEV抗体结合的能力,为进一步鉴定不同编码区的免疫原性及抗原保护能力奠定了基础。

关 键 词:猪传染性胃肠炎病毒  S基因  原核表达  反应原性

Prokaryotic Expression and Immunoreactivity of Different Encoding Regions of the Spike Gene of Porcine Transmissible Gastroenteritis Virus
ZHOU Hong-zhuan,TAN Xiang-jie,YANG Bing,XU Fu-zhou,MAN Kun,SU Xia,ZHANG Xiao-dong,LIU Jue,LUO Xu-gang,WANG Jin-luo.Prokaryotic Expression and Immunoreactivity of Different Encoding Regions of the Spike Gene of Porcine Transmissible Gastroenteritis Virus[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2014(6).
Authors:ZHOU Hong-zhuan  TAN Xiang-jie  YANG Bing  XU Fu-zhou  MAN Kun  SU Xia  ZHANG Xiao-dong  LIU Jue  LUO Xu-gang  WANG Jin-luo
Abstract:
Keywords:Porcine transmissible gastroenteritis virus  Spike gene  Prokaryotic expression  Immunoreactivity
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