黄色瘤胃球菌木聚糖酶基因xynB的异源表达与酶学性质研究 |
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作者姓名: | 毕海红 胡馨元 王玉洁 翟圣君 张竞月 孙丽萍 王琴 夏呈强 |
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作者单位: | 山西农业大学动物科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年项目(32002143);;国家重点研发计划专项子课题(2022YFD1300705);;山西省重点研发计划项目(202102140601019); |
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摘 要: | 该试验以黄色瘤胃球菌基因组为模板,通过PCR扩增获得目的基因xynB,将xynB与表达载体PET28a连接,获得重组载体PET28a-xynB。用IPTG对含有重组载体的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,镍离子层析柱纯化后检测其酶学性质。生物信息学分析表明,XynB理论大小为47 kDa,预测等电点为4.49,不含信号肽,含有1个糖苷水解酶11家族结构域和1个碳水化合物结合结构域。酶学性质研究结果表明,该酶的最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃,金属离子Mg2+、Na+、K+和Ba2+对木聚糖酶XynB有较好的激活效果。综上可知,黄色瘤胃球菌木聚糖酶XynB属于GH11家族,最适pH值为5.0,最适温度为40℃,酶比活力为62.94 U/mg。
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关 键 词: | 黄色瘤胃球菌 木聚糖酶 xynB 异源表达 酶学性质 |
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