黄色瘤胃球菌木聚糖酶基因xynB的异源表达与酶学性质研究

该试验以黄色瘤胃球菌基因组为模板，通过PCR扩增获得目的基因xynB，将xynB与表达载体PET28a连接，获得重组载体PET28a-xynB。用IPTG对含有重组载体的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达，镍离子层析柱纯化后检测其酶学性质。生物信息学分析表明，XynB理论大小为47 kDa，预测等电点为4.49，不含信号肽，含有1个糖苷水解酶11家族结构域和1个碳水化合物结合结构域。酶学性质研究结果表明，该酶的最适pH值为5.0，最适反应温度为40℃，金属离子Mg²⁺、Na⁺、K⁺和Ba²⁺对木聚糖酶XynB有较好的激活效果。综上可知，黄色瘤胃球菌木聚糖酶XynB属于GH11家族，最适pH值为5.0，最适温度为40℃，酶比活力为62.94 U/mg。