| 稻瘟病菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(gpd)的快速克隆(英文) |
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| 引用本文： | 鲁国东,王宗华,谢联辉,郑学勤. 稻瘟病菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(gpd)的快速克隆(英文)[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 1998, 0(5) |
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| 作者姓名： | 鲁国东 王宗华 谢联辉 郑学勤 |
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| 作者单位： | 福建农业大学植保系，中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室 |
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| 摘 要： | 本文描述了一种简便而有效的克隆基因未知５＇和３＇末端序列的方法，并用此方法克隆了稻瘟病菌的３－磷酸甘油醛脱氢酶基因（ｇｐｄ）．即通过比较１２种真菌的已知ｇｐｄ基因序列，寻找内部的保守区段，设计并合成一对特异性引物．引物Ｐ１为靠近基因５＇端的一个特异性序列，引物Ｐ２则与３＇端的一段特异性序列互补．以双链ｃＤＮＡ－ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ载体连接物为模板，利用基因的特异性引物Ｐ１和载体上的标准测序引物Ｔ７，ＰＣＲ扩增出包含ｃＤＮＡ３＇末端的序列；利用特异性引物Ｐ２和标准测序引物Ｔ３，扩增出包含ｃＤＮＡ５＇末端的序列．将两片段分别克隆、测序和合并后，得到全长１０１１ｂｐ的稻瘟病菌３－磷酸甘油醛脱氢酶基因（ｇｐｄ）的编码区序列．该序列及其相应的氨基酸序列与已知真菌的ｇｐｄ基因序列有着６１．４％－８６．６％和６４．６％－８６．３％的同源性．特别在酶的活性功能区不同真菌间有着近乎相同的氨基酸序列．
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| 关 键 词： | 稻瘟病菌；3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（gpd）；克隆方法 |
Rapid Cloning Full length cDNA of Glyceraldehyde 3 phosphate Dehydrogenase Gene (gpd) from Magnaporthe grisea |
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| Lu Guodong , Wang Zonghua , Xie Lianhui , Zheng Xueqin. Rapid Cloning Full length cDNA of Glyceraldehyde 3 phosphate Dehydrogenase Gene (gpd) from Magnaporthe grisea[J]. Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences), 1998, 0(5) |
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| Authors: | Lu Guodong Wang Zonghua Xie Lianhui Zheng Xueqin |
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| Affiliation: | Lu Guodong 1, Wang Zonghua 1, Xie Lianhui 1, Zheng Xueqin 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Magnaporthe grisea Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase gene (gpd) cloning method |
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