非洲猪瘟病毒与猪伪狂犬病病毒双重PCR检测方法的建立

为建立一种同时检测非洲猪瘟病毒（ASFV）和猪伪狂犬病病毒（PRV）的方法，本研究根据GenBank中的ASFV 72基因和PR V UL27基因的保守序列分别设计2对特异性引物，通过对双重PCR反应条件的优化，建立快速检测ASFV和PR V的双重PCR方法，并对该方法的特异性和敏感性进行验证。特异性试验结果显示，该方法对ASFV与PRV核酸的扩增能获得246 bp和401 bp的特异性目的片段，而对PRRSV、PEDV和CSFV的核酸扩增均为阴性；敏感性试验结果显示，该方法对ASFV和PRV核酸最低检测量分别为0.01 pg和0.12 pg。结果表明：建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性较好、快速简便等特点，可用于这两种病毒的同时检测和鉴别诊断。