鸡毒支原体PstS蛋白的原核表达及其定位 |
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引用本文: | 宋春,杨美,岳筠,单春兰,王开功,程振涛.鸡毒支原体PstS蛋白的原核表达及其定位[J].福建农林大学学报(自然科学版),2023(3):344-350. |
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作者姓名: | 宋春 杨美 岳筠 单春兰 王开功 程振涛 |
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作者单位: | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 贵州省动物疫病预防控制中心;3. 贵州大学贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(32060786、31660723);;贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号);;贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646); |
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摘 要: | 通过SOE-PCR技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ,将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS,将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白,通过Western blot分析PstS蛋白的亚细胞定位.结果表明,PstS基因长度为1 065 bp,其蛋白在氨基酸9~31之间存在跨膜区,pCold-PstS经诱导表达获得融合蛋白PstS(存在于细胞膜和胞浆中),其约43 ku并具有较好的抗原性. PstS蛋白是鸡毒支原体膜表面的免疫原性蛋白,可为进一步研究其生物学功能和基因工程疫苗提供依据.
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关 键 词: | 鸡毒支原体 PstS基因 原核表达 亚细胞定位 |
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