| Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 何永吉,卢晓霞,梁雅丽,潘薇薇,赵峰梅,赵邑.Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达[J].广东农业科学,2012,39(12):151-153,174. |
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| 作者姓名： | 何永吉 卢晓霞 梁雅丽 潘薇薇 赵峰梅 赵邑 |
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| 作者单位： | 山西省生物研究所,山西太原,030006 |
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| 基金项目： | 山西省青年科技研究基金 |
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| 摘 要： | 采用PT-PCR扩增Pyk2-kinase基因,定向克隆至转移载体pFastBac HTB,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH10Bac中,转座后利用抗性及蓝白斑筛选阳性克隆获得重组Bacmid/Pyk2-kinase;提取重组杆粒,PCR法鉴定后转染昆虫细胞Sf9包装重组杆状病毒;利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过间接免疫荧光(IFA)、SDS-PAGE和Western blot检测表达情况。最终获得了重组杆状病毒rBac-Pyk2-kinase,实现了Pyk2-kinase在Sf9细胞中的重组表达,其相对分子质量为32 ku,IFA、SDS-PAGE和Western blot检测结果与预期一致。
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| 关 键 词： | Pyk2 激酶区蛋白 杆状病毒 表达 |
Expression and analysis of Pyk2 kinase domain in baculovirus expression system |
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| HE Yong-ji
,
LU Xiao-xia
,
LIANG Ya-li
,
PAN Wei-wei
,
ZHAO Feng-mei
,
ZHAO Yi.Expression and analysis of Pyk2 kinase domain in baculovirus expression system[J].Guangdong Agricultural Sciences,2012,39(12):151-153,174. |
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| Authors: | HE Yong-ji LU Xiao-xia LIANG Ya-li PAN Wei-wei ZHAO Feng-mei ZHAO Yi |
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| Institution: | (Biology Institute of Shanxi,Taiyuan 030006,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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