无籽沙糖橘泛素结合酶E2基因CrUBC2的克隆及功能分析 |
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引用本文: | 吴秀兰,李桂花,唐文武.无籽沙糖橘泛素结合酶E2基因CrUBC2的克隆及功能分析[J].园艺学报,2023(10):2069-2078. |
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作者姓名: | 吴秀兰 李桂花 唐文武 |
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作者单位: | 1. 肇庆学院食品与制药工程学院;2. 广东省农业科学院蔬菜研究所;3. 肇庆学院生命科学学院 |
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基金项目: | 肇庆市科技计划资助项目(2015B010201001); |
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摘 要: | 泛素结合酶E2是底物泛素化的关键酶,通过泛素—蛋白酶体系统对雌蕊S-RNase进行泛素化和降解,在自交不亲和机制中发挥重要作用。以‘无籽沙糖橘’和‘沙糖橘’的花蕾为试材,以甜橙EST序列EY715921为依据克隆到965bp的cDNA全长序列,其编码152个氨基酸的UBC2蛋白,命名为CrUBC2。在‘无籽沙糖橘’和‘沙糖橘’的编码区发现1个C/T替换,并引起苏氨酸(Thr)变成异亮氨酸(Ile)。多序列比对表明‘沙糖橘’与其他8种植物UBC2仅有1个氨基酸差异,表现出进化中的高度保守性。qRT-PCR分析表明CrUBC2在花药中的表达量最高,异交授粉后的基因表达量是自交授粉的2.22倍~5.36倍,呈现明显的特异表达。体外花粉萌发试验表明,‘无籽沙糖橘’CrUBC2蛋白对自交花粉管生长有明显抑制作用,但对异交花粉管生长无影响,这可能与该蛋白参与S-RNase泛素化并导致异交亲和有关。
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关 键 词: | 沙糖橘 CrUBC2 自交不亲和 基因克隆 功能分析 |
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