| 利用CRISPR-Cas9技术编辑Badh2基因创制优质香型籼稻三系不育系 |
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| 引用本文： | 韦新宇,曾跃辉,杨旺兴,肖长春,候新坡,黄建鸿,邹文广,许旭明.利用CRISPR-Cas9技术编辑Badh2基因创制优质香型籼稻三系不育系[J].作物学报,2023(8):2144-2159. |
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| 作者姓名： | 韦新宇 曾跃辉 杨旺兴 肖长春 候新坡 黄建鸿 邹文广 许旭明 |
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| 作者单位： | 1. 三明市农业科学研究院生物技术研究所;2. 福建省(山区)作物遗传改良与创新利用重点实验室;3. 三明市农业科学研究院水稻研究所 |
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| 基金项目： | 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-01)；;福建省自然科学基金项目(2021J01535,2021J01536)；;三明市科技计划项目(2019-N-4)资助~~； |
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| 摘 要： | 稻米香味是水稻的重要食味品质之一,其主要受第8染色体上编码甜菜碱脱氢酶基因Badh2控制,该基因突变可导致香味物质2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP)的含量增加从而促进香味的产生。本研究以三明市农业科学研究院自主选育的优质籼型杂交稻保持系明太B为受体,利用CRISPR-Cas9技术对其Badh2基因进行编辑和敲除。获得2个T0代转基因纯合突变体植株并对其衍生的48个T1代单株进行鉴定和分析,获得1个不含转基因载体骨架且在第2外显子插入单个碱基T的纯合突变体株系明太B-badh2。利用半定量PCR和qRT-PCR技术以及气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测Badh2基因相对表达量和2-AP含量;同时采用农业行业标准(NY/T1433-2014)推荐的48对水稻SSR引物进行指纹图谱分析。结果表明,该株系Badh2基因RNA表达水平显著下调;籽粒中香味物质2-AP的含量显著增加;指纹图谱分析发现,仅1对引物Rm571在野生型和突变体之间鉴定到等位变异,两组材料遗传差异较小。此外,本研究还对野生型和突变体T2代植株表型性状、稻米蒸...
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| 关 键 词： | 水稻 CRISPR-Cas9 基因编辑 香味 Badh2 2-乙酰-1-吡咯啉(2-AP) |
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