| 大豆GmbZIP71基因的克隆及EMSA分析 |
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| 引用本文： | 刘晓兵,南海洋,袁晓辉,刘宝辉,孔凡江.大豆GmbZIP71基因的克隆及EMSA分析[J].大豆科学,2015,34(1). |
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| 作者姓名： | 刘晓兵 南海洋 袁晓辉 刘宝辉 孔凡江 |
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| 作者单位： | 1. 黑龙江省种子管理局,黑龙江哈尔滨,150008
2. 中国科学院东北地理与农业生态研究所/大豆分子设计育种重点实验室,黑龙江哈尔滨,150081 |
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| 摘 要： | 通过PCR扩增的方法从大豆品种Harosoy中克隆到1个新的b ZIP基因(Gmb ZIP71),基因表达分析表明Gmb ZIP71在叶片、生长点、花、花芽、荚和根等多个器官中表达。将Gmb ZIP71构建到原核表达载体p ET29b上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行IPTG诱导。结果表明:在IPTG浓度为0.25 mmol·L-1,诱导时间为4 h,诱导温度为28℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为48 k Da,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用His蛋白纯化系统回收得到Gmb ZIP71-His重组蛋白,EMSA(electrophoretic mobility shift assay)实验表明Gmb ZIP71重组蛋白可以在体外与ACGT顺式作用元件结合。
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| 关 键 词： | 大豆 bZIP 原核表达 EMSA |
Expression Analysis and EMSA of Soybean GmbZIP71 Gene |
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| LIU Xiao-bing,NAN Hai-yang,YUAN Xiao-hui,LIU Bao-hui,KONG Fan-jiang.Expression Analysis and EMSA of Soybean GmbZIP71 Gene[J].Soybean Science,2015,34(1). |
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| Authors: | LIU Xiao-bing NAN Hai-yang YUAN Xiao-hui LIU Bao-hui KONG Fan-jiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Soybean bZIP Prokaryotic expression EMSA |
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