| 番茄遗传转化与筛选鉴定的改进研究 |
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| 引用本文： | 祁春芳,王 婷,刘霞宇,石晓雯,于治芹,刘世芳,梁建萍,贾小云.番茄遗传转化与筛选鉴定的改进研究[J].西北农业学报,2018,27(4):554-561. |
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| 作者姓名： | 祁春芳 王 婷 刘霞宇 石晓雯 于治芹 刘世芳 梁建萍 贾小云 |
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| 作者单位： | 山西省桑干河杨树丰产林实验局;山西农业大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31101555）；山西农业大学研究生创新项目（20143058）；山西省高等学校优秀青年学术带头人项目（2012）；山西人才引进与开发专项（614191）；山西省农业科技成果转化和推广示范项目（2018-5）；山西农业大学科技创新基金（2018）。 |
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| 摘 要： | 将At-pri-miR828基因的过表达载体pC2300-pOT2-At-pri-miR828通过农杆菌侵染法转入番茄(Solanum lycopersicum L.)品种‘Ailsa Craig’为例,来对番茄的遗传转化过程中番茄种子消毒处理、无菌苗培养、转基因阳性植株的Kan筛选浓度、PCR检测等方法进行研究,旨在探索一套快速高效的番茄遗传转化及鉴定方法。研究发现:采用C_2H_5OH、Na_3PO_3及NaClO分别浸泡及无菌水反复冲洗的种子消毒方法,可使污染率减少到5%以下;种子震荡培养法可以提高发芽率并促进种苗的生长势一致;筛选转基因阳性植株的Kan最佳质量浓度为100mg·L~(-1);100mg·L~(-1)的Kan溶液浇灌蛭石和在MS培养基中添加Kan的方法都可以用来筛选转基因番茄。最终Kan筛选和PCR检测等鉴定方法显示番茄的遗传转化效率为32.5%。
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| 关 键 词： | 番茄 种子消毒 遗传转化 Kan筛选 |
Optimization of Tomato Genetic Transformation and Identification |
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| QI Chunfang,WANG Ting,LIU Xiayu,SHI Xiaowen,YU Zhiqin,LIU Shifang,LIANG Jianping and JIA Xiaoyun.Optimization of Tomato Genetic Transformation and Identification[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2018,27(4):554-561. |
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| Authors: | QI Chunfang WANG Ting LIU Xiayu SHI Xiaowen YU Zhiqin LIU Shifang LIANG Jianping and JIA Xiaoyun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tomato Seed disinfection Genetic transformation Kanamycin screening |
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