| 禽多杀性巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌和大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 张 曼,韩 飞,沈文正,何亚鹏. 禽多杀性巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌和大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用[J]. 西北农业学报, 2018, 27(2): 163-168 |
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| 作者姓名： | 张 曼 韩 飞 沈文正 何亚鹏 |
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| 作者单位： | 杨凌职业技术学院; |
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| 基金项目： | 陕西省咸阳市重大科技创新项目（2016K01-43）；杨凌农业高新技术示范区重大科技项目（2016-XY-16）。 |
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| 摘 要： | 为了建立鉴别禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum)和大肠杆菌(Escherichia coli)的多重PCR检测方法,参照GenBank中登录的3种细菌基因组序列,合成3对特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立快速检测3种细菌的多重PCR方法。特异性试验结果表明,可分别扩增出3种细菌对应的目的片段,对Ⅰ群禽腺病毒4型(FAV-4)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonellaspp)、鸡胚成纤维细胞(DF-1)的DNA和灭菌双蒸水均无扩增;敏感性试验结果表明,最低检测量分别为24.3pg/μL禽多杀性巴氏杆菌、21.4pg/μL副鸡嗜血杆菌和28.6pg/μL鸡大肠杆菌的基因组DNA;应用该方法对83份临床病料进行检测,结果与其他已建立的单重PCR检测一致,说明所建立的方法可用于临床上3种细菌的鉴别诊断。
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| 关 键 词： | 多重PCR；多杀性巴氏杆菌；副鸡嗜血杆菌；大肠杆菌；检测 |
Establishment and Application of Multiplex PCR Assay for Detecting Pasteurella multocida,Haemophilus paragallinarum and Escherichia coli |
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| ZHANG Man,HAN Fei,SHEN Wenzheng and HE Yapeng. Establishment and Application of Multiplex PCR Assay for Detecting Pasteurella multocida,Haemophilus paragallinarum and Escherichia coli[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2018, 27(2): 163-168 |
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| Authors: | ZHANG Man HAN Fei SHEN Wenzheng HE Yapeng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Multiplex PCR Pasteurella multocida Haemophilus paragallinarum Escherichia coli Detection |
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