| 卵形鲳鲹 JAK3 蛋白的原核表达与纯化 |
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| 引用本文： | 杨 萌,高爽爽,谢业扬,段家文,陆专灵,韦友传. 卵形鲳鲹 JAK3 蛋白的原核表达与纯化[J]. 广东农业科学, 2020, 47(1): 137-142 |
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| 作者姓名： | 杨 萌 高爽爽 谢业扬 段家文 陆专灵 韦友传 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院，广西 南宁 530004；2. 广西水产科学研究院 / 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西 南宁 530021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31860736）；广西创新驱动发展专项（桂科 AA17204094-8） |
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| 摘 要： | 【目的】纯化获取卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)JAK3(TroJAK3)重组蛋白,为了解TroJAK3蛋白功能、相互作用及抗体制备奠定基础。【方法】应用分子生物学技术构建重组质粒pET-32a-TroJAK3,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测TroJAK3重组蛋白表达情况。【结果】PCR扩增片段长度为3 333 bp,经双酶切鉴定、测序确认序列和开放阅读框正确,结果显示成功构建重组质粒pET-32a-TroJAK3。经终浓度为1 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h后进行SDS-PAGE检测,结果表明TroJAK3重组蛋白以包涵体形式大量表达,分子量约为140 ku。经Ni-IDA树脂柱纯化,获得纯化的重组蛋白。Western blot检测结果显示有140 ku的条带,表明TroJAK3重组蛋白能被抗His抗体识别。【结论】成功构建了重组质粒pET-32a-TroJAK3,纯化得到高纯度的TroJAK3融合蛋白。
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| 关 键 词： | 卵形鲳鲹；JAK3 蛋白；原核表达；蛋白纯化 |
Prokaryotic Expression and Purification of JAK3 Protein in Golden Pompano (Trachinotus ovatus) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trachinotus ovatus JAK3 protein prokaryotic expression protein purification |
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