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环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体的研究
引用本文:钱建飞,毛洪先.环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体的研究[J].中国农业科学,1996,29(3):86-94.
作者姓名:钱建飞  毛洪先
作者单位:江苏省农业科学院畜牧兽医研究所,南京 210014
摘    要: 采用纯化的鸡IgG免疫环磷酰胺预处理BALB/c小鼠后,再用亲和层析纯化的鸡IgM进行免疫,运用淋巴细胞杂交瘤技术,以间接ELISA法筛选,获得了5株能稳定地分泌抗鸡IgMμ链特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经ELISA交叉反应性试验和羊抗鸡IgMμ链抗血清阻断试验,证明这5株单克隆抗体均是抗鸡IgMμ链特异性的。采用环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体,其杂交瘤细胞阳性率为8.696%,而用常规免疫法为4.032%,前者比后者杂交瘤细胞阳性率提高1倍以上。经两次有限稀释法克隆和比较后,免疫抑制法获得5株单克隆抗体,而常规免疫法只获得2株单克隆抗体,前者有3株单克隆抗体腹水ELISA效价达到10#+(-12)、10#+(-14)、10#+(-15);后者单克隆抗体腹水ELISA效价为10#+(-5)和10#+(-6)。因此,与常规免疫法相比,环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体具有杂交瘤细胞阳性率高,分泌的单克隆抗体特异性强、滴度高等优点,值得推广。

关 键 词:鸡IgM  环磷酰胺  单克隆抗体

Development of Monoclonal Antibodies with Immunosuppressive Pretreated with Cyclophosphamide
Qian Jianfei Mao Hongxian Shao Guoqing Jin Hongxiao Lli Lixin.Development of Monoclonal Antibodies with Immunosuppressive Pretreated with Cyclophosphamide[J].Scientia Agricultura Sinica,1996,29(3):86-94.
Authors:Qian Jianfei Mao Hongxian Shao Guoqing Jin Hongxiao Lli Lixin
Abstract:
Keywords:Chicken IgM  Cyclophosphamide  Monoclonal antibody  
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