| 木质素合成酶COMT基因的PCR扩增条件优化 |
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| 引用本文： | 薛永常,郭昭. 木质素合成酶COMT基因的PCR扩增条件优化[J]. 河南农业科学, 2008, 0(8) |
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| 作者姓名： | 薛永常 郭昭 |
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| 作者单位： | 大连工业大学,生物与食品工程学院,辽宁,大连116034 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金，辽宁省教育厅资助项目 |
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| 摘 要： | 以2×CTAB法从欧美杨107号嫩叶提取的基因组DNA为试材,建立了木质素合成酶COMT基因的PCR扩增体系。通过对PCR反应的影响因子——模板DNA用量、dNTP浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和退火温度进行优化,最终建立了扩增COMT的PCR优化体系为:在20μL的反应体系中,dNTP为2.5 pmol,引物各为5 pmol,模板为5 ng,Red TaqTMDNA聚合酶1.25 U,退火温度为51℃,可以扩增出清晰的扩增带。
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| 关 键 词： | COMT 优化 聚合酶链式反应 |
Optimization of PCR Conditions for Amplifying the Lignin Biosynthesis COMT Gene |
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| XUE Yong-chang,GUO Zhao. Optimization of PCR Conditions for Amplifying the Lignin Biosynthesis COMT Gene[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences, 2008, 0(8) |
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| Authors: | XUE Yong-chang GUO Zhao |
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| Abstract: | The lignin biosynthesis enzyme COMT gene was amplified from poplar(Populus×euramericana cv.74/76) leaves.The PCR amplification conditions were optimized by adjusting the contents of DNA template,dNTP,Taq DNA polymerase,primers and melting temperature.The optimal reaction system of PCR was as follows: 2μl 10×PCR buffer,1.25U Red TaqTM DNA polymerase,5 ng DNA templates,5pmol primers,2.5pmol dNTP mixtures in a total 20μL reaction volume with the melting temperature at 51 ℃. |
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| Keywords: | COMT |
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