牛金黄色葡萄球菌山东分离株β-溶血素基因的克隆及序列分析 |
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作者姓名: | 杨钦 王长法 杨宏军 杨少华 高运东 仲跻峰 彭广能 |
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作者单位: | 1. 山东省农科院奶牛研究中心,山东,济南250100;四川农业大学动物医学院,四川,雅安625014;山东省潍坊市昌乐县畜牧局朱刘兽医站,山东,潍坊262404 2. 山东省农科院奶牛研究中心,山东,济南250100 3. 四川农业大学动物医学院,四川,雅安625014 |
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基金项目: | 山东省中青年科学家基金,山东省农科院重大成果培育基金,山东省农科院高技术自主创新基金,四川省教育厅自然科学基金预研项目 |
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摘 要: | 根据GenBank上发表的金黄色葡萄球菌β-溶血素基因序列,设计了一对特异性引物。提取临床乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌山东株zfb的全基因组DNA为PCR模板,扩增β-溶血素基因,将PCR产物纯化后连接到pMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有993 bp的ORF,可编码含330个氨基酸和1个终止子的成熟蛋白,与已报道的金黄色葡萄球菌β-溶血素蛋白的氨基酸组成同源性为99.4%。软件分析显示,克隆的金葡菌β-溶血素是一种依赖于金属离子的磷脂酶。上述结果显示,已获得金黄色葡萄球菌β-溶血素基因,为获得重组金黄色葡萄球菌β-溶血素蛋白及对其结构和功能的研究奠定了基础。
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关 键 词: | 金黄色葡萄球菌 溶血素 克隆 表达 |
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