直接、快速地从罹病小麦叶片中提取条锈菌基因组DNA的方法 |
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作者姓名: | 兰茗清# 刘林# 杨静 武静雯 张培花 顾中量 李成云 |
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作者单位: | 1云南农业大学,农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南 昆明 650201; 2云南省德宏州植保站,德宏 潞西 678400 |
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摘 要: | 小麦条锈菌(Puccinia striiformis f. sp. tritici)是专性程度很高的活体寄生菌,通过分子技术对其进行群体遗传结构研究的过程中,基因组DNA提取是基础之一。本研究利用Chelex 100法和CTAB法直接提取罹条锈病的小麦病叶片上的小麦条锈病菌的基因组DNA,使用PCR对所得到的DNA进行真菌核糖体rDNA ITS和小麦条锈病菌特异性引物CYR33进行检测,对2种基因组DNA的提取方法进行比较分析,结果表明Chelex 100法和CTAB法都能够适合于从罹病组织中直接提取小麦条锈病菌的基因组DNA,但是Chelex 100法较CTAB法所需的样品量少,操作步骤少,操作简单,并且整个过程无需使用有机溶剂进行抽提,对人体比较安全。通过PCR检测DNA提取情况,发现Chelex 100法提取的DNA的PCR结果优于CTAB法,且能够满足基于PCR的群体遗传结构的分析等研究。
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关 键 词: | 小麦条锈病菌 DNA提取 Chelex 100法 |
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