水稻纹枯病菌原生质体制备与再生条件的优化 |
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引用本文: | 杨迎青,李明海,杨 媚,李 勇,周而勋.水稻纹枯病菌原生质体制备与再生条件的优化[J].华中农业大学学报,2010,29(5):546-551. |
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作者姓名: | 杨迎青 李明海 杨 媚 李 勇 周而勋 |
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作者单位: | 华南农业大学资源环境学院,广州,510642 |
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基金项目: | 国家2007年公益性行业(农业)科研专项,教育部留学回国人员科研启动基金项目 |
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摘 要: | 为获得进行水稻纹枯病菌遗传转化所需的高质量原生质体,选用该病菌强致病力菌株GD-118,分别从酶种类、菌龄、酶解时间、酶解温度、酶液pH值和渗透压稳定剂及其浓度6个方面优化了原生质体的制备条件,从酶解时间和渗透压稳定剂及其浓度2个方面优化了原生质体的再生条件。结果表明:优化后的水稻纹枯病菌原生质体制备的最佳条件组合是"纤维素酶+溶菌酶+崩溃酶"组合酶、总酶终质量浓度10mg/mL、菌丝菌龄15h、酶解时间3h、酶解温度35℃、酶液pH5.6、以0.6mol/LMgSO4.7H2O为渗透压稳定剂,此最佳条件组合所制备的原生质体产率高达4.00×107/g;原生质体最佳的再生条件是酶解3h的原生质体在含1.0mol/L甘露醇的再生培养基上26℃时进行培养,在此条件下可获得最佳的再生效果,再生率为39%。
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关 键 词: | 水稻纹枯病菌 原生质体 制备 再生 |
收稿时间: | 2010/2/26 0:00:00 |
修稿时间: | 2010/4/12 0:00:00 |
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