| 非洲猪瘟病毒p54蛋白的表达及单抗制备 |
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| 引用本文： | 冯春燕,宋晓晖,仇松寅,王淑娟,王彩霞,张永宁,邓俊花,吴绍强,林祥梅. 非洲猪瘟病毒p54蛋白的表达及单抗制备[J]. 中国动物检疫, 2016, 33(5): 80-84 |
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| 作者姓名： | 冯春燕 宋晓晖 仇松寅 王淑娟 王彩霞 张永宁 邓俊花 吴绍强 林祥梅 |
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| 基金项目： | 十二五科技支撑计划（2013BAD12B01）；国家质检总局科技计划项目（2015IK310） |
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| 摘 要： | 为制备非洲猪瘟病毒p54蛋白的单克隆抗体,本研究扩增p54蛋白的胞外区编码基因,分别克隆到p ET30a和p GEX-6p-1中,构建了p54-p ET30a和p54-p GEX-6p-1重组质粒;将质粒分别转化到大肠杆菌BL21中,表达C末端带6个His、N端带有GST的p54重组蛋白;利用亲和层析的方法,富集和纯化带His标签的p54蛋白;以带His标签的p54蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备单克隆抗体;以带有GST标签的p54蛋白为抗原,对制备的单抗进行特异性验证。结果显示:大肠杆菌能高效表达带His标签和GST标签的非洲猪瘟p54蛋白;His标签的p54蛋白免疫BALB/C小鼠后,得到了3株单克隆抗体;Western blot结果表明,3株单克隆抗体能与带有GST标签的p54蛋白相互反应。本研究成功制备了p54的单克隆抗体,为进一步开展非洲猪瘟ELISA、Western blot和细胞免疫荧光检测技术的开发研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒；p54蛋白；体外表达；单克隆抗体 |
Expression and Purification of p54 Protein of Africa Swine Fever Disease and Production of Its Specific Monoclonal Antibodies |
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| Feng Chunyan,Song Xiaohui,Qiu Songyin,Wang Shujuan,Wang Caixi,Zhang Yongning,Deng Junhu,Wu Shaoqiang,Lin Xiangmei. Expression and Purification of p54 Protein of Africa Swine Fever Disease and Production of Its Specific Monoclonal Antibodies[J]. China Animal Health Inspection, 2016, 33(5): 80-84 |
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| Authors: | Feng Chunyan Song Xiaohui Qiu Songyin Wang Shujuan Wang Caixi Zhang Yongning Deng Junhu Wu Shaoqiang Lin Xiangmei |
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