高粱SCoT-PCR反应体系的建立与优化

为利用分子标记辅助育种技术更好地保护高粱的种质资源,本试验构建了高粱SCoT-PCR的最佳反应体系。试验采用单因素实验设计的方法对影响高粱SCoT-PCR反应体系的5个因素,即dNTP用量、DNA的用量、Mg~(2+)浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度分别进行梯度设计优化分析,并对得到的最佳体系进行验证。综合单因素试验结果,明确在高粱SCoT-PCR 25μL反应体系中,最佳反应体系为:引物2.0μL,DNA 1.25μL,dNTP 1.0μL,Taq DNA聚合酶0.2μL,Mg~(2+)2.0μL。本试验研究结果可为高粱的遗传多样性研究提供良好研究基础,并为高粱种质保护、育种提供帮助。