| 鸭坦布苏病毒包膜蛋白的原核表达和间接ELISA抗体检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 郝明飞,张琳,胡北侠,崔言顺,张秀美. 鸭坦布苏病毒包膜蛋白的原核表达和间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 动物医学进展, 2012, 33(12) |
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| 作者姓名： | 郝明飞 张琳 胡北侠 崔言顺 张秀美 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学,山东泰安,271018
2. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业(农业)科研专项"水禽主要疫病快速诊断与疫苗研制" |
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| 摘 要： | 为建立特异性和敏感性高的检测鸭坦布苏病毒感染的方法,采用原核表达系统对鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因进行了克隆与表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白大小为54.3 ku.Western blot结果表明,经亲和层析法纯化后的重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组E蛋白作为包被抗原,初步建立了检测E蛋白抗体的间接ELISA方法.对ELISA各种反应条件进行了优化,确定了最适工作条件.优化后确定的抗原最适包被浓度为7 μg/mL,血清的最佳稀释度为1；320,酶标抗体最适稀释度为1:1 000.在优化条件下,阴性和阳性临界值判定标准为0.324 4.本研究建立的快速检测DT-MUV抗体的间接ELISA方法为该病的检测和流行病学调查提供了技术手段.
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 包膜蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验 |
Prokaryotic Expression of Envelope Protein of Duck Tembusu Virus and Development of Indirect ELISA for Detection of Viral IgG |
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| HAO Ming-fei , ZHANG Lin , HU Bei-xia , CUI Yan-shun , ZHANG Xiu-mei. Prokaryotic Expression of Envelope Protein of Duck Tembusu Virus and Development of Indirect ELISA for Detection of Viral IgG[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2012, 33(12) |
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| Authors: | HAO Ming-fei ZHANG Lin HU Bei-xia CUI Yan-shun ZHANG Xiu-mei |
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