| 猪A组轮状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 高婉俊,王静,林鸷,曹伟伟,张彦明. 猪A组轮状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 动物医学进展, 2012, 33(12) |
| |
| 作者姓名： | 高婉俊 王静 林鸷 曹伟伟 张彦明 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
| |
| 基金项目： | 教育部高等学校博士点基金项目(博导类) |
| |
| 摘 要： | 本试验旨在建立一种检测猪A组轮状病毒的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法.参考GenBank上登录的猪轮状病毒OSU株的VP6基因序列保守区设计一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆目的基因,并将其连入pMD 19-T Vector,制备阳性标准品,优化反应条件.建立的方法在1.0×102～1.0×109拷贝/μL范围内线性关系良好,反应扩增效率大于90％,扩增相关系数大于0.98.对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪圆环病毒2型均检测不到荧光信号,表明该方法特异性强.该方法批内和批间变异系数均小于2％,重复性好.结果表明,建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法可为A组猪轮状病毒早期感染的诊断及病毒定量分析提供技术支持.
|
| 关 键 词： | A组轮状病毒 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量PCR 猪 |
Development of Real Time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Porcine Rotavirus A |
| |
| GAO Wan-jun , WANG Jing , LIN Zhi , CAO Wei-wei , ZHANG Yang-ming. Development of Real Time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Porcine Rotavirus A[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2012, 33(12) |
| |
| Authors: | GAO Wan-jun WANG Jing LIN Zhi CAO Wei-wei ZHANG Yang-ming |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
