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鲤鱼外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28全长cDNA的克隆与差异表达分析
引用本文:李莲瑞,卢强,付宝权,谭业平,邓洪宽,崔国祯,夏慧卿,刘明远,韩文瑜. 鲤鱼外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28全长cDNA的克隆与差异表达分析[J]. 中国兽医学报, 2006, 26(5): 544-547
作者姓名:李莲瑞  卢强  付宝权  谭业平  邓洪宽  崔国祯  夏慧卿  刘明远  韩文瑜
作者单位:1. 吉林大学,人兽共患病研究所,吉林,长春,130062;新疆塔里木大学,兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆,阿克苏阿拉尔,843300
2. 吉林大学,人兽共患病研究所,吉林,长春,130062
3. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046
摘    要:对DD-RTPCR获得的差异显示片段C15进行地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得阳性克隆DM7。测序分析表明,该阳性克隆长1 097 bp,具有完整的开放阅读框架,为编码鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28的全长cDNA,编码249个氨基酸,含有PA28的α和β亚单位功能结构域,与已报道的斑马鱼的蛋白酶体激活因子PA28的同源性达93%。分离鲤鱼外周血白细胞,经有丝分裂原在不同条件下刺激后,利用Trizol提取总RNA,根据得到的PA28全长cDNA序列和鲤鱼β-actin的序列,设计引物,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定白细胞中PA28基因mRNA表达量的变化。结果表明,白细胞经LPS、ConA刺激后,PA28基因的mRNA表达量有所增加,但并不随时间的延长而持续增加。

关 键 词:鲤鱼  cDNA克隆  表达鉴定
文章编号:1005-4545(2006)05-0544-03
收稿时间:2005-04-27
修稿时间:2005-04-27

Cloning and Identification of Proteasome Activator PA28 Full Length cDNA of Carp(Cyprinus carpio L.)
LI Lian-rui,LU Qiang,FU Bao-quan,TAN Ye-ping,DENG Hong-kuan,CUI Guo-zhen,XIA Hui-qing,LIU Ming-yuan,HAN Wen-yu. Cloning and Identification of Proteasome Activator PA28 Full Length cDNA of Carp(Cyprinus carpio L.)[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2006, 26(5): 544-547
Authors:LI Lian-rui  LU Qiang  FU Bao-quan  TAN Ye-ping  DENG Hong-kuan  CUI Guo-zhen  XIA Hui-qing  LIU Ming-yuan  HAN Wen-yu
Abstract:
Keywords:PA28
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