胃蛋白酶原Ⅱ单抗制备及夹心ELISA的初步建立 |
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引用本文: | 张红绪,孙青芸,王继创,李恒思,张怡青,董彩文,李玉林,刘旺根,景建洲,王云龙.胃蛋白酶原Ⅱ单抗制备及夹心ELISA的初步建立[J].动物医学进展,2012,33(4):56-59. |
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作者姓名: | 张红绪 孙青芸 王继创 李恒思 张怡青 董彩文 李玉林 刘旺根 景建洲 王云龙 |
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作者单位: | 1. 河南师范大学,河南新乡,453007 2. 河南生物工程技术研究中心,河南郑州,450021 3. 郑州轻工业学院,河南郑州,450021 4. 郑州职业技术学院,河南郑州,450121 |
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基金项目: | 河南省科技创新团队和郑州市科技创新团队项目 |
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摘 要: | 制备配对胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)单抗,建立人血清中胃蛋白酶原Ⅱ夹心ELISA检测方法。用胃蛋白酶原Ⅱ免疫Balb/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0融合,用HAT培养基进行筛选培养,间接ELISA检测阳性克隆,对阳性孔进行多次单克隆化,选出效价高、分泌性能稳定的杂交瘤细胞,制备腹水并进行纯化。进行单抗配对,建立胃蛋白酶原Ⅱ双抗体夹心检测方法。获得1D8、1C6、2H11、2E3等4株杂交瘤,经配对试验,确定1D8、2H11可作为夹心ELISA检测PGⅡ的单抗。成功制备出配对单抗,初步建立了PGⅡ双抗体夹心ELISA方法。
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关 键 词: | 胃蛋白酶原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA |
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