泛素基因沉默对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响 |
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引用本文: | 刘超英,董骎,高洪,严玉霖,富国文,单春兰.泛素基因沉默对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响[J].江苏农业科学,2019,47(8). |
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作者姓名: | 刘超英 董骎 高洪 严玉霖 富国文 单春兰 |
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作者单位: | 云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;云南省高等学校科技创新团队支持计划;云南生猪产业技术体系建设专项 |
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摘 要: | 为了探讨泛素(ubiquitin,简称Ub)对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响,通过脂质体将短发夹RNA(shRNA)质粒转染猪小肠上皮细胞,使其泛素基因沉默,于转染后6、12、24、48 h收集细胞及其上清。应用荧光定量PCR检测细胞内TLR4/NF-κB信号通路中关键分子TLR4、NF-κB、MyD88、IκB-α的mRNA表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB、IκB-α及炎性因子TNF-α、IL-1含量的变化。结果显示,shRNA质粒有效地抑制了泛素基因的表达,转染shRNA质粒后,TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、MyD88和IκB-α的mRNA表达量及NF-κB、IκB-α、TNF-α和IL-1含量均普遍呈下降的趋势,说明泛素在炎性因子的释放中起着至关重要的作用,泛素基因的沉默能够抑制该通路的活化。
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关 键 词: | 泛素 基因沉默 信号通路 炎性因子 |
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