枯草芽孢杆菌粗酶液对Cry1Ac蛋白质的降解特性

为了明确枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)粗酶液对Cry1Ac毒蛋白质的降解特征,采用蛋白质凝胶电泳十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)]和酶联免疫吸附法(ELISA),在不同温度和pH值条件下测定该菌粗酶液降解Cry1Ac蛋白质的特性。结果表明,枯草芽孢杆菌主要以胞外酶液降解Cry1Ac蛋白质,胞外粗酶液在40℃、pH值为10的条件下对Cry1Ac蛋白质的降解效果最佳,粗酶液S_1对Cry1Ac蛋白质降解的米氏常数(K_m)为2.099 4μg/L,最大反应速度(V_(max))为0.239 58μg/(L·min)。在降解45 min时,Cry1Ac蛋白质含量由4.987μg/L降至0.159μg/L,其降解程度达极显著水平(P0.01),其降解率为96.815%。枯草芽孢杆菌的胞外酶液主要发挥降解Cry1Ac蛋白质的作用,其粗酶液对Cry1Ac蛋白质的降解最适条件为40℃、pH值为10以及K_m为2.099 4μg/L。